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实验动物接种与剖检            【字体:
实验动物接种与剖检
作者:佚名    文章来源:不详    点击数:    更新时间:2007-8-26



文章摘要实验动物接种与剖检一、实验目的1.学习并掌握实验动物的接种方法;2.学习并掌握实验动物的剖检方法。二、实验内容在微生物实验和研究工作中,动物实验是常用的技术之一,其主要用途有以下几方面:1.进行病原体的分离和鉴定有些直接分离培养有困难的病原菌或需鉴定的细菌,通过易感动物体就可达到......


醉,用刀片在颈静脉沟内切一长口,露出颈动脉并结扎,于近心端插入一玻璃导管,使血液自行流至无菌容器内,凝后析出血清;如利用全血,可直接流入含抗凝剂的瓶内,或含有玻璃珠的三角瓶内振荡脱纤防凝。放血可达 50ml 以上。 2 . 豚鼠采血法 豚鼠一般从心脏采血。助手使动物仰卧保定,术者在动物胸部心跳最明显处剪毛消毒,用针头插入胸壁稍向右下方刺人。刺入心脏则血液可自行流入针管,一次未刺中心脏稍偏时,可将针头稍提起向另一方向再刺。如多次没有刺中,应换一动物,否则有心脏出血致死亡的可能。 3 . 小白鼠采血法 可将尾部消毒,用剪刀断尾少许,使血液溢出,即得血液数滴,采血后用烧烙法止血。也可自心脏采血,或摘除眼球放血。 4 . 绵羊采血法 在微生物实验室中绵羊血最常用。采血时由一助手半坐骑在羊背上,两手各持其一耳(或角)或下颚,因为羊的习惯好后退,令尾靠住墙根。术者在其颈部上 1/3 处剪毛消毒,一手压在静脉沟下部使静脉努张,右手持针头猛力刺入皮肤,此时血液流入注射器或直接流入无菌容器内,一切应无菌操作,以获得无菌血液。 5 . 鸡采血法 剪破鸡冠可采血数滴供作血片用。少量采血可从翅静脉采取,将翅静脉刺破以试管盛之,或用注射器采血,需大量血可用心脏采取:固定家禽使侧卧于桌上,左胸部朝上,从胸骨脊前端至背部下凹处连线的中点垂直刺人,约 1 寸深即可采得心血。一次可采 10 ~ 20ml 血液。

(三)实验动物的观察

1 .动物接种后,须按照试验要求进行观察和护理。 ( 1 ) 外表检查 注射部位皮肤有无发红、肿胀及水肿、脓肿、坏死等。检查眼结膜有无肿胀发炎和分泌物。对体表淋巴结注意有无肿胀、发硬或软化等。 ( 2 ) 体温检查 注射后有无体温升高反应和体温稽留、回升、下降等表现。 ( 3 ) 呼吸检查 检查呼吸次数,呼吸或呼吸状态(节律、强度等)。观察鼻分泌物的数量、色泽和粘稠性等。 ( 4 ) 循环器官检查 检查心脏搏动情况,有无心动衰弱,紊乱和加速,并检查脉搏的频度节律等。 2 .正常实验动物的体温、脉搏和呼吸(见表 6-1 )。 表 6-1 正常实验动物的体温、脉搏和呼吸 动物 体温(℃) 脉搏(次 / 分钟) 呼吸(次 / 分钟) 猪 38.5 — 40.0 60 — 80 10 — 20 绵羊或山羊 38.5 — 40.0 70 — 80 12 — 20 犬 37.5 — 39.0 70 — 120 10 — 30 猫 38.0 — 39.0 110 — 120 20 — 30 豚鼠 38.5 — 40.0 150 100 — 150 大白鼠 37.0 — 38.5 - 21 小白鼠 37.4 — 38.0 - - 鸡 41.0 — 42.5 140 15 — 30 鸭 41.0 — 42.5 140 — 200 16 — 28 鹅 41.0 — 42.5 140 — 200 16 — 28 3 .实验动物经接种后而死亡或予以扑杀后,应对其尸体进行剖解,以观察其病变情况,并可取材保存或进一步作微生物学、病理学、寄生虫学、毒物学等检查。 ( 1 )先用肉眼观察动物体表的情况。 ( 2 )将动物尸体仰卧固定于解剖板上,充分露出胸腹部。 ( 3 )用 70% 酒精或其它消毒液浸擦尸体的颈胸腹部的皮毛。 ( 4 )以无菌剪刀自其颈部至耻骨部切开皮肤,并将四肢腋窝处皮肤剪开,剥离胸腹部皮肤使其尽量翻向外侧,注意皮下组织有无出血、水肿等病变,观察腋下、腹股沟淋巴结有无病变) ( 5 )用毛细管或注射器穿过腹壁及腹膜吸取腹腔渗出液供直接培养或涂片检查。 ( 6 )另换一套灭菌剪剪开腹腔,观察肝、脾及肠系膜等有无变化,采取肝、脾、肾等实质脏器各一小块放在灭菌平皿内,以备培养或直接涂片检查。然后剪开胸腔,观察心、肺有无病变,可用无菌注射器或吸管吸取心脏血液进行直接培养或涂片 r ( 7 )必要时破颅取脑组织作检查。 ( 8 )如欲作组织切片检查,将各种组织小块置于 10 %甲醛溶液中固定。 ( 9 )剖检完毕妥善处理动物尸体,以免散播传染,最好火化或高压蒸汽灭菌,或者深埋,若是小白鼠尸体可浸泡于 3 %来苏儿液中杀菌,而后倒人深坑中,令其自然腐败,所用解剖器械也须煮沸消毒,用具用 3 %来苏儿浸泡消毒。    

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