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实验动物接种与剖检

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实验动物接种与剖检

作者：佚名文章来源：不详点击数：更新时间：2007-8-26

文章摘要：实验动物接种与剖检一、实验目的1．学习并掌握实验动物的接种方法；2．学习并掌握实验动物的剖检方法。二、实验内容在微生物实验和研究工作中，动物实验是常用的技术之一，其主要用途有以下几方面：1．进行病原体的分离和鉴定有些直接分离培养有困难的病原菌或需鉴定的细菌，通过易感动物体就可达到......

实验动物接种与剖检

一、实验目的

1 ．学习并掌握实验动物的接种方法； 2 ．学习并掌握实验动物的剖检方法。

二、实验内容

在微生物实验和研究工作中，动物实验是常用的技术之一，其主要用途有以下几方面： 1 ． 进行病原体的分离和鉴定 有些直接分离培养有困难的病原菌或需鉴定的细菌，通过易感动物体就可达到目的。如从子宫分泌物中分离布鲁氏菌，可用豚鼠接种法。 2 ． 确定病原体的致病力 有些细菌在形态、生物学特性等方面性状相似，仅在致病性上不同，可利用动物试验鉴别。 3 ； 恢复或增强细菌的毒力 多数病原菌长期通过人工传代保存后，其毒力减弱，须通过易感动物恢复或增强其致病力。 4 ． 测定某些细菌的外毒素 如产气荚膜梭菌的毒素测定。 5 ． 制备疫苗或诊断用抗原 如兔化猪瘟疫苗。 6 ． 制备作诊断或治疗用的免疫血清 如作鉴定用的沙门氏菌诊断血清。 7 ． 用于检验药物的治疗效果及毒性 等

（一）实验动物接种法

1 ． 接种材料 细菌培养物（肉汤培养物或细菌悬液）、尿液、脑脊液、血液、分泌物、脏器组织悬液等。 2 ． 实验动物 常用的动物有家兔、豚鼠（也称海豚、荷兰猪、天竺鼠）、大白鼠、小白鼠及绵羊等。所需实验动物以自行繁殖为最方便可靠，如必须向外购买、要选择健康无病未做过任何试验的动物。 3 ． 实验动物常用的接种方法 （ 1 ） 皮肤划痕接种 实验动物多用家兔，用剪毛剪剪去胁腹部长毛，必要时再用剃刀或脱毛剂脱去被毛，以 75 ％酒精消毒，待干，用无菌小刀在皮肤上划成几条平行线。划痕口可略见出血，然后用刀将接种材料涂在划痕口上。（ 2 ） 皮下接种 ① 家兔皮下接种 由助手把家兔伏卧或仰卧保定，于其背侧或腹侧皮下结缔组织疏松部分剪毛消毒，术者右手持注射器，以左手拇指，食指和中指捏起皮肤使成一个三角形皱褶，或用镊子夹起皮肤、于其底部进针，感到针头可随意拨动即表示插入皮下。当推入注射物时感到流利畅通也表示在皮下，拨出注射针头时用消毒棉球按针孔并稍加按摩。 ② 豚鼠皮下接种 保定和术式同家兔。 ③ 小白鼠皮下接种 无须助手帮助保定，术者在做好接种准备后，先用右手抓住鼠尾，令其前爪抓住饲养罐的铁丝盖，然后用左手的拇指及食指捏住颈部皮肤，并翻转左手使小鼠腹部朝上，将其尾巴挟在左手掌与小手指之间，右手消毒术部，把持注射器、以针头稍微挑起皮肤插入皮下，注入时见有水泡微微鼓起即表示注入皮下。拔出针头后，同家兔皮下注射时一样处理。（ 3 ） 皮内接种 作家兔、豚鼠及小白鼠皮内接种时，均需助手保定动物，其保定方法同皮下接种。接种时术者以左手拇指及食指夹起皮肤，右手持注射器、用细针头插入拇指及食指之间的皮肤内针头插入不宜过深，同时插入角度要小，注入时感到有阻力且注射完毕后皮肤上有小硬疱即为注入皮内。皮内接种要慢，以防使皮肤胀裂或自针孔流出注射物而散播传染。（ 4 ） 肌肉接种 肌肉注射部位在禽类为胸肌，其它动物为后肢内股部。术者消毒后，将针头刺人肌肉内注射感染材料。（ 5 ） 腹腔内接种 在家兔、豚鼠、小白鼠作腹腔接种，宜采用仰卧保定、接种时稍抬高后躯，使其内脏倾向前腔，在腹后侧面插入针头，先刺人皮下，后进入腹腔、注射时应无阻力，皮肤也隆起。（ 6 ） 静脉注射 ① 家兔的静脉注射 将家兔纳入保定器内或由助手把握住它的前、后躯保定、选一侧耳边缘静脉，先用 75 ％酒精涂擦兔耳或以手指轻弹耳朵，使静脉扩张。注射时，用左手拇指和食指拉紧兔耳，右手持注射器，使针头与静脉平行，向心脏方向刺人静脉内，注射时无阻力且有血向前流动表示注入静脉、缓缓注射感染材料，注射完毕用消毒棉球紧压针孔，以免流血或注射物溢出。 ② 豚鼠静脉内接种 使豚鼠伏卧保定。腹面向下，将其后肢剃毛、用 75 ％酒精消毒皮肤，施以全身麻醉，用锐利刀片向后肢内上侧向外下方切一长约 1 厘米的切口，使露出皮下静脉，用最小号针头刺人静脉内慢慢注入感染材料。接种完毕，将切口缝合一两针。 ③ 小白鼠静脉接种 其注射部位为尾侧静脉。选 15 ～ 20g 体重的小白鼠，注射前将尾部血管扩张易于注射。用一烧杯扣住小白鼠，露出尾部，最小号针头（ 4 号）刺人侧尾静脉，缓缓注入接种物，注射时无阻力，皮肤不变白、不隆起，表示注入到静脉内。（ 7 ） 脑内接种法 作病毒实验研究时，有时用脑内接种法，通常多用小白鼠，特别是乳鼠（ 1 ～ 3 日龄），注射部位是耳根连线中点略偏左（或右）处。接种时用乙醚使小白鼠轻度麻醉，术部用碘酒，酒精棉球消毒，在注射部位用最小号针头经皮肤和颅骨稍向后下刺人脑内进行注射，先后以棉球压住针孔片刻，接种乳鼠时一般不麻醉，不用碘酒消毒。家兔和豚鼠脑内接种法基本同小白鼠，唯其颅骨稍硬厚，事先用短锥钻孔，然后再注射、深度宜浅，以免伤及脑组织。 4 ． 注射量 家兔 0.20m1 ，豚鼠 0.15m1 ，小白鼠 0.03m1 。凡作脑内注射后一小时内出现神经症状的动物作废，认为是接种创伤所致。

（二）实验动物采血法

如欲取得清晰透明的血清，宜于早晨没有饲喂前抽取血液。如采血量较多则应在采血后，以生理盐水作静脉（或腹腔内）注射或饮用盐水以补充水份。 1 ． 家兔采血法 可采自其耳静脉或心脏，耳边缘静脉采血方法基本与静脉接种相同，不同之处是以针尖向耳尖反向抽吸其血，一般可采血 1 ～ 2m1 。如采大量血液，则用心脏采血法。动物左仰卧由助手保定，或以绳索将四肢固定，术者在动物左前肢腋下处局部剪毛及消毒，在胸部心脏跳动最明显处下针。用一寸半长 12 号针头，直刺心脏，感到针头跳动或有血液向针管内流动时，即可抽血，一次可采血 15 ～ 20m1 。如采其全血，可自颈动脉放血。将动物保定，左颈部剃毛消毒，动物稍加麻

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