氨基酸的消化率是评定单胃动物饲料蛋白质营养价值的重要参数。在氨基酸的消化率中，回肠末端真消化率因其有更好的可加性（Nyachoti等，1997）、合理性和准确性而被广泛采用，而要测定回肠末端真消化率，就必需正确评估动物的内源性氨基酸的排泄量。目前，内源性氨基酸的测定方法主要有以下几种。

    1.内源氨基酸测定的传统方法

    内源氨基酸测定的这几种方法都不能与原料的测定同时进行，因此也有人称之为“非生理状态测定法”，且把用此法测出的内源氨基酸含量称为“最低内源氨基酸损失量“（Vincent Hess等，1997）。

    1.1无氮日粮法（proteinfree diet ） 

    无氮日粮法是测定饲料氨基酸真消化率最经典的方法，它是由Mitchell在1924建立的。其假定条件是动物采食无氮日粮后，进入食糜或粪中的蛋白质、氨基酸即为内源性的，并且在日粮组成不同的条件下，动物内源性氨基酸的排泄量和氨基酸组成是相同或相似。然而事实是并非如此。low(1979)指出,饲喂无氮日粮可能改变动物的代谢而影响内源氮的损失量。Ozimek等（1985）发现，动物采食无氮日粮后，胰腺分泌的消化酶,如胰蛋白酶、糜蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶减少，肠道分泌的蛋白总量也减少。研究还发现，无氮日粮不仅改变了动物的内源氮损失量，也使内源氨基酸的组成发生了变化，大大增加了了内源脯氨酸和甘氨酸的损失（De Lange，1989)。这是因为，动物采食无氮日粮时，由于动物体维持正常生命活动和生产活动所需的蛋白质无法从无氮日粮中摄取，于是动用肌肉组织释放大量氨基酸，其中以谷氨酰胺最多，谷氨酰胺又代谢成谷氨酸、脯氨酸等，因此猪采食无氮日粮时，食糜中脯氨酸含量增加，而且随着无氮日粮中纤维素水平的升高，回肠末端食糜中甘氨酸和脯氨酸的量显著增加（de Lange 等，1989；Leterme等，1992； Mariscal-Landin等，1995），这是由于日粮中的纤维素刺激了唾液和胆汁分泌的结果（Low,1982），唾液和胆汁分泌的糖蛋白中含有较多的甘氨酸和脯氨酸。

    无氮日粮法简便，易操作，成本低，至尽仍在广泛采用。但用该方法测定内源氮时，动物处于非正常生理状态（low,1980），影响动物体蛋白质的正常的代谢(Millward等，1976)，减少含氮物质向消化道的分泌。Butts等（1992）和Donkoh等（1995）研究表明，无氮日粮因缺乏蛋白质类对消化道的刺激，会低估回肠末端内源性氨基酸的含量。此外，日粮成分中的纤维、抗营养因子等可能提高内源性氨基酸的排泄量（Ikegami,1990;Liener和Kakade,1980），而无氮日粮中因缺乏这类物质的刺激，也会导致测定结果偏低。因此，一般认为无氮日粮低估了猪的内源性氨基酸的排泄量（Butts等，1993； Donkoh和Moughan,1999）。 

    1.2回归外延法 

    为了克服无氮日粮的缺陷，Carlson等（1970）发明了一种回归外延法，用以估测内源性氨基酸的排泄量。其方法是，测定猪饲喂不同蛋白质水平的日粮时粪中或食糜中的蛋白质或氨基酸量，然后用数理统计的方法，外推出日粮蛋白质水平为零时，粪或食糜中蛋白质或氨基酸的量， 即为内源性蛋白质或氨基酸的损失量。Fan等（1995）认为该法对内源氮的损失的估计比无氮日粮法有更高的准确性，因为这种方法考虑了不同品质的蛋白质和抗营养因子等对内源氮和氨基酸排出的影响（souffrant,1991;Fan等，1995）。然而，大量的研究表明，回归外延法与无氮日粮法并没有什么差异（Taverner等,1981;Furuya 和 Kaji,1989;Donkoh等,1995）。该方法虽然考虑了日粮蛋白质含量对内源性氨基酸排泄量的影响，但与无氮日粮法一样，在计算饲料氨基酸真消化率时，仍然存在不同的饲料都扣除同量内源性氨基酸。而且，Souffrant(1991)研究发现，蛋白质采食量与内源性氨基酸排泄量不存在线性关系，而且饲料蛋白水平的增加总是与其它营养物质成分的改变相联系，因此，影响了对结果进行准确的估测。

    1.3完全可消化蛋白源法或静脉灌注平衡氨基酸法 

    为避免无氮日粮对动物造成的非生理状态对测定造成的不利影响，Leibholz(1982)给生长猪饲喂以完全消化的酪蛋白为唯一氮源的日粮估测内源氨基酸排泄量，结果发现，内源氮的排泄量与无氮日粮的测定值没有显著差异（分别为3.4和3.0g/kgDMI）。然而Fuller和Cadenhead(1991)向无氮日粮中添加酪氨酸和合成氨基酸，结果表明，采食酪氨酸和合成氨基酸日粮的猪的内源氮的损失低于采食无氮日粮猪的内源氮损失（分别为4.3和5.8g/d）。后者的研究结果与Lange等（1989）的研究结果一致。这说明，处于正氮平衡状态下猪的内源性氨基酸的损失量稍低于处于负氮平衡下内源氨基酸的损失量。Leterme等（1994）比较了无氮日粮、可消化酪蛋白法和静脉灌注平衡氨基酸法对回肠内氨基酸损失的影响，结果表明，静脉灌注平衡氨基酸法测得的内源氨基酸损失（除脯氨酸、胱氨酸和蛋氨酸外）与无氮日粮法没有明显差异。因为氨基酸并不能起到蛋白质或多肽刺激消化酶分泌的作用，但由于静脉灌注氨基酸可以消除负氮平衡导致的体组织分解，因而可减少尿氮损失。

     该法前提条件是，酪氨酸或平衡氨基酸在消化道内被完全吸收。而事实上，日粮中的粗纤维水平（Bergner等，1994）和抗营养因子含量（Huisman等，1992）都可能影响其吸收，而只有当酪氨酸或平衡氨基酸的的真消化率经试验证明达到100%时，该方法在实际应用中才能得到可靠的结果。

     2.同位素标记法

    同位素标记技术是直接测定猪采食含蛋白质日粮时内源氮损失的一种方法。一般用15N 或13C对饲料蛋白或动物体氨基酸库进行标记。

     2.115N同位素标记法 

    15N同位素标记技术可区分内源氮和非消化氮，而且可用于测定日粮成分变化对内源氮和氨基酸

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